Статья

ПРОБЛЕМА ДНК(РНК)-КОНТАМИНАЦИИ В ЛАБОРАТОРИИ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ДИАГНОСТИКИ COVID-19 МЕТОДОМ ПЦР

Анна Сергеевна Волынкина, Алла Геннадьевна Рязанова, Диана Владимировна Русанова, Александр Николаевич Куличенко,
2020

Проанализированы факторы, приводящие к контаминации нуклеиновыми кислотами в лабораториях, выполняющих массовые исследования клинического материала методом ПЦР на наличие РНК нового коронавируса SARS-CoV-2 в условиях пандемии COVID-19. Основными причинами, способствующими возникновению контаминации, являются большие объемы исследований, накопление в лаборатории образцов клинического материала, увеличение количества отходов, содержащих продукты амплификации. Перекрестная контаминация происходит вследствие технических ошибок при выполнении лабораторных манипуляций на этапах пробоподготовки и обеззараживания материала, выделения РНК, внесения проб кДНК/РНК, положительных контрольных образцов в реакционную смесь. Загрязнение рабочих зон лаборатории ампликонами, возникающее при открытии пробирок и планшетов, содержащих продукты ПЦР – главная причина тотальной контаминации в лаборатории. Признаками перекрестной контаминации являются увеличение доли положительных проб с низкими значениями порогового цикла и выявление положительного сигнала в отрицательных контрольных образцах этапов выделения и амплификации. Получение положительного результата для всех проб в постановке, включая отрицательные контрольные образцы, свидетельствует о «тотальной контаминации» в лаборатории. Помимо контаминации, к ложноположительным результатам анализа может приводить образование неспецифических продуктов ПЦР на поздних циклах реакции и неспецифическая флуоресценция реакционной смеси, возникающая при несоблюдении температурного режима хранения реактивов. Для предотвращения контаминациии в лаборатории, выполняющей исследования методом ПЦР, необходим строгий контроль соблюдения поточности движения исследуемого материала и медицинских отходов, регулярный анализ частоты положительных ответов, обязательное проведение внутрилабораторного контроля качества исследований и ДНК(РНК) контаминации.

Цитирование

Похожие публикации

Документы

Источник

Версии

  • 1. Version of Record от 2020-12-28

Метаданные

Об авторах
  • Анна Сергеевна Волынкина
  • Алла Геннадьевна Рязанова
  • Диана Владимировна Русанова
  • Александр Николаевич Куличенко
Тип документа
  • preprint
Тип лицензии Creative Commons
  • CC BY
Правовой статус документа
  • Свободная лицензия
Источник
  • covid19-preprints.microbe.ru